科学家们研究表明,转基因作物能产生新病毒,且引发新疾病。
植物病毒严重地损害了粮食作物和纤维作物。为了减少有害病毒的传播,农学家们采用杀虫药剂和其它因子消灭病毒媒介,或者植物排毒,消除病毒源。其它防御病毒的方法是,在植物育种过程中,有病毒-植物自由遗传物质把抗病基因导入作物体内。近来,防御病毒的新方法是植物病毒基因组片段在转基因植物体内表达,具有抗相应病毒的作用。这种方法有风险吗?格林和阿里森研究表明。反把豆卷叶花叶病毒(CCMV)基因组RNA片段接种到转基因植物(烟草属植物Nicotiana benthamiana)体内,RNA片段表达出现基因组重组,CCMV突变是缺失。植物的转基因RNA和病毒的基因组RNA能够大量重组。这种重组能产生有危害性的新病毒吗?格林和阿里森认为,抗病毒转基因植物能重组RNA,且有一定的危险性。
植物病毒是由单股RNA基因组构成,常有10000个核苷酸。在植物病毒复制过程中,RNA-RNA重组是一个罕见的事件,这大概是病毒基因组进行的作用。在强烈选择的作用下,出现了RNA重组,有4种植物病毒RNA可发生RNA-RNA分子间重组。4种植物病毒分别是苜蓿花叶病毒、雀麦花叶病毒组、番茄丛矮病毒和花椰菜花叶病毒。在相关RNA分子间可发生RNA-RNA重组;在不同RNAs(类似RNA结构的位点)也可发生重组。
在农业种植条件下,植物病毒能够相互遗传和传播。通过自然病毒媒介体、基因嵌入和遗传物质感染,病毒基因分布较广泛。带毒植物可再次感染其它病毒。作物和杂草可发生多重和单一感染。例如,遗传工程葫芦科植物(甜瓜、黄瓜和南瓜)可释放抗病毒变异体,且病毒加倍感染。5种病毒可重新感染一种植物。混合感染已有报道,但尚未发现抑制传染(感染接种细胞,但不能漫延)。植物病毒能够感染植物原生质体。病毒易感染植物细胞,但不能感染整个植株,混合感染可使病毒基因结合在一起。病毒感染植物时,一些装配基因可亲和其它病毒基因,且能够转基因表达。因此,病毒RNA之间可重组,但不能感染特殊植物。病毒不能相互抑制。
为什么在转基因植物体内病毒基因表达没有一定的范围?在植物体内抗病毒能指导病毒外壳蛋白基因、RNA复制基因片段或缺失病毒活性蛋白基因表达。采用抗基因表达和核糖酶方法防御植物病毒,也需要病毒基因组片段表达。遗传工程植物普遍会增强植物-病毒RNA重组吗?由于宿主范围广,这种重组事件能引起病毒变异,且难于控制。病毒基因组的突变和重组能够装配吗?现在还不能解决这些问题。但这些因素可影响RNA-RNA重组。
在选择条件下检测基因重组。格林和阿里森认为,病毒RNA和细胞RNA可发生重组。在高度选择作用下,病毒和转基因RNAs能够重组。在弱选择和非选择条件下,在复制病毒基因组RNAs序列,病毒获转基因序列和多重交换序列中都没有发现重组。在高度选择条件下,发现了相似序列间的少量重组。
基因重组研究表明,在选择条件下,中等相同区(100个相同基因)中发现2个RNAs重组;长相同区(1000个相同基因)中转基因和病毒RNAs重组比病毒-病毒RNA重组不易发生。
病毒基因组序列间重组具有经济和生态学意义。病毒基因组RNAs可发生突变和重组。其重组频率比相同病毒基因组RNA高。重组竞争可减少疾病。重组频率是指在作物体内,转基因和病毒基因组RNA序列和相同结构的重组次数;重组基因组RNA竞争可引起分子在亚细胞中定位和1、2或更多的重组事件。
在转基因植物中,表达序列和靶病毒基因组RNA序列相似。转基因序列和非靶病毒基因组RNAs不相同。有人认为,转基因序列是新的重组。相同序列的重组频率比不同序列的重组(转基因RNA和基因组RNA或2个基因组RNA分子的重组事件)更高。我们不能预测相同基因组序列和不同序列重组所产生的有害病毒。在一些实例中,不同病毒基因结合重组可产生新病毒,但这些新病毒比亲本病毒的生存能力有明显的降低。由此表明,相应的自然重组没有生存能力或丢失。
我们认为,在自然和限制感染的植物体内,转基因RNA和病毒基因组RNA的重组频率比病毒基因组RNAs重组的高。新病毒的活性比相应病毒强。其完全感染周期是:感染新宿主,新病毒的非外壳、基因表达、复制和装配,选择宿主感染。
由于抗病毒培养的发展,在传统植物育种中发现了变异病毒株。但在农业上,这种病毒造成的经济损失比淘汰的植物育种的少。在自然发病的过程中,遗传工程抗病毒基因的危害性比新的有害的病毒小。
(Science,1994年3月11日)